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多肽的溶解与保存

Published: 2016-04-11

Keyword: 多肽修饰,抗菌肽

      多肽的组成

      多肽就是α-氨基酸以肽键连接在一起而形成的化合物,它也是蛋白质水解的中间产物。由两个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫做二肽,同理类推还有三肽、四肽、五肽等。通常由三个或三个以上氨基酸分子脱水缩合而成的化合物都可以成为叫多肽。


      多肽的溶解方法



      溶解多肽是一件很复杂的事情,所以很难一下子找到合适的溶剂。以前都是先取一点做实验,在没有找到合适的溶剂之前一定不要全部溶解。

      选择合适的溶剂的方法:

1、判断多肽的电荷特定,设定酸性氨基酸Asp(D),Glu(E)和C端COOH为-1;碱性氨基酸Lys(K),Arg(R),His(H)及N端NH2为+1,其它氨基酸的电荷为0。计算出将电荷数。

2、如果净电荷数>0,多肽为碱性,用水溶解:如果不溶解或溶解性不大,加入醋酸(10%以上);如果多肽还不能溶解,加入少量TFA(25ul)溶解,然后加入500ul水稀释。

3、如果净电荷数<0,多肽为酸性,用水溶解;如果不溶解或溶解性不大,加入氨水(25ul)溶解,然后加入500ul水稀释。

      4如果净电荷数=0,多肽为中性,一般需要用有机溶剂如乙腈,甲醇或异丙醇,DMSO等溶解。还有人建议需要尿素来溶解疏水性很大的多肽。 

      多肽的保存方法

      如果多肽想要长期保存是需要避光保存的,应该保存在-20度以下的温度,短期保存可以在4℃的温度。多肽一般在-20℃是很稳定的,尤其是冷冻干燥并保存在干燥器中时,将多肽放在空气之前, 冷冻干燥多肽可以放在室温自然升温,这将使湿度的影响相对减少,当没有办法冷冻干燥时候,最好的方法是以小的工作样量存放。 
      对于含Cys, Met or Trp的多肽,脱氧缓冲剂对其溶解那是必要的工作,因为这种多肽很容易被空气氧化, 在密封的时候,氮气或氩气保护会降低氧化作用。含Gln或Asn的多肽相比较会比较容易降解,所有这些肽与不含这些有问题的简单肽相比,保存期要短。